鸡肉参抗疲劳作用机制的研究
摘要:目的研究鸡肉参的抗疲劳作用机制。方法:采用对照组及鸡肉参乙醇提取物低、中、高3个不同浓度剂量组对小鼠灌胃24 d后进行游泳实验,并对血乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清尿素氮(BUN)、肝糖原、肌糖原等进行了测试。结果:鸡肉参可提高肝糖原、肌糖原的储备量, 及提高乳酸脱氢酶活力,同时降低血清尿素氮和血乳酸水平。结论:鸡肉参具明显的抗疲劳功能。
关键词:鸡肉参;肌糖原;肝糖原;LD;LDH;BUN
鸡肉参为角蒿属紫薇科植物滇川角蒿,鸡肉参主要分布在云南(大理、丽江)、西藏、四川等地区。主要生长在高山草丛、灌木丛中或疏林中。其性甘、淡、温,具有滋补强壮,补气养血之功效。杨月娥等对其进行了生药鉴定[1]。我们早期的研究表明鸡肉参有抗应激的作用[2],但对其抗疲劳的机制尚不清楚,因此我们对疲劳小鼠LDH活力、LD含量、BUN含量和肌糖原、肝糖原含量的变化进行了检测,对鸡肉参的抗疲劳机制做了进一步的探讨。
1材料和方法
1.1 材料
鸡肉参,采自大理花甸地区(海拔2400-3655米),经大理学院药学院马晓匡教授鉴定为紫崴科植物滇川角蒿。鸡肉参乙醇提取物由大理学院天然药物化学实验室施贵荣老师提供(每1 g浸膏相当于2.2 g生药材)。临用时配制成浸膏浓度为8%、16%、32%的三种混悬液。人参总皂苷(惠州市东方植物保健科技有限公司,批号:20070516),临用时配制成浓度为1%的水溶液。乳酸试剂盒(批号:20081114)、乳酸脱氢酶试剂盒(批号:20081114)、血清尿素氮试剂盒(批号:20081114)、肌糖原试剂盒(批号:20081114)、肝糖原试剂盒(批号:20081114)均购于南京建成生物工程研究所。恒温水浴锅(上海医疗器械七厂,型号:HH-W21-CU600);台式高速冷冻离心机(上海离心机机械研究所,型号:TL-16R) ;电子天平(梅勒特-托利多仪器上海有限公司,型号:YYAL204-IC) ;紫外分光光度计(上海精密科析仪器有限公司,型号:756)。动物:昆明种小鼠由云南生物制药有限公司提供,雌雄各半,体重18-22g;动物实验许可证号为:SCXK(滇2005)-0007。
1.2 给药方式
取昆明种小鼠适应性饲养3 d后随机分为5个剂量组(生理盐水组、阳性对照组、鸡肉参浸膏低剂量组、鸡肉参浸膏中剂量组、鸡肉参浸膏高剂量组),每组10只。其中生理盐水组(A组) 灌胃(ig)生理盐水;阳性对照组(B组) ig人参总皂苷水溶液0.2g·(kg-1·d-1) ;试验组(C1, C2, C3)分别ig鸡肉参浸膏1.6, 3.2, 6.4g·(kg-1·d-1) ,以上各组给药剂量均为0.2mL·10g -1体重。给药方式均为ig 1次·d-1,连续给药24 d。
1.3 生化指标测定
LD:末次给药30 min后,小鼠在水温为(30±0.5)℃,深度为35 cm的水中游泳,10 min后取出,置笼中擦干休息5 min后摘眼球采血,制备血清,用乳酸试剂盒测定血清中的LD含量。
LDH:末次给药30 min后,小鼠在水温为(30±0.5)℃,深度为35 cm的水中游泳,10 min后取出,置笼中擦干休息5 min后摘眼球采血,制备血清,用乳酸脱氢酶试剂盒测定LDH的活力。
BUN:末次给药30 min后,小鼠在水温为(30±0.5)℃,深度为35 cm的水中游泳,10 min后取出,置笼中擦干休息5 min后摘眼球采血,制备血清,用血清尿素氮试剂盒测定
肌糖原:末次给药30 min后处死动物,取新鲜肌肉,经生理盐水漂洗后用滤纸擦干,称取一定量的肌肉(m≤100 mg),用肌糖原试剂盒测定肌糖原的含量。
肝糖原:末次给药30 min后处死动物,取新鲜肝脏,经生理盐水漂洗后用滤纸擦干,称取一定量的肝脏(m≤100 mg),用肝糖原试剂盒测定肝糖原的含量。
1.4 数据处理
所有实验数据用±s表示,并采用SPSS 13.0软件进行分析。
2 结果
由表1可见,小鼠经口服不同剂量鸡肉参浸膏24 d后,肝糖原明显升高(P<0.01),同时肌糖原含量也升高(P<0.05),其中肝糖原以C2剂量组作用明显。小鼠经口服不同剂量鸡肉参浸膏24 d后,C1、C2、C3三个剂量组LD显著降低(P<0.05),C1和C2剂量组LD降低效果显著(P<0.001),证明鸡肉参可降低LD含量。小鼠经口服不同剂量鸡肉参浸膏24 d后,C1、C2、C3三个剂量组的LDH活力均高于A组(P<0.05),其中C2剂量组有明显的显著性差(P<0.001)。小鼠经口服不同剂量鸡肉参浸膏24 d后,C1、C2、C3三个剂量组BUN有显著降低(P<0.05),其中以低剂量组作用最明显(P<0.001),鸡肉参可降低BUN含量。且各生化指标的A组与B组均有显著性差异(P<0.05),证明实验结果可信。
C1、C2、C3三个剂量组与B组进行比较时发现,肝糖原,肌糖原与人参组间无显著性差异(P>0.05), LD的中剂量组与人参组有明显的显著性差异(P<0.001),低剂量与人参组也有显著性差异(P<0.01),LDH的高剂量组与人参组有显著性差异(P<0.05),BUN的低剂量组与人参组也有明显的显著性差异(P<0.01)。
表1 鸡肉参浸膏对小鼠血生化指标的影响(±s,n=10)
组别 |
剂量 (g/ kg·d) |
肝糖原含量 (mg/g ) |
肌糖原含量 (mg/g ) |
LD含量 (mmol/L) |
LDH活力 (U/L) |
BUN含量 (mg/dL) |
A |
- |
23.26±15.40 |
0.65±0.32 |
19.66±3.78 |
8651.73±2923.92 |
6.72±1.19 |
B |
0.2 |
60.83±32.72** |
0.94±0.34* |
11.30±1.59*** |
11413.95±2282.78*** |
6.012±0.66*** |
C1 |
1.6 |
45.47±27.05 |
1.23±0.47* |
14.06±1.61***△△ |
11556.06±3696.92** |
4.02±1.19***△△ |
C2 |
3.2 |
57.90±19.17** |
0.92±0.21* |
14.06±4.63***△△△ |
11792.29±2454.77*** |
5.29±0.72** |
C3 |
6.4 |
57.42±21.49** |
0.90±0.38 |
11.84±6.45* |
5539.97±3468.62*△ |
5.14±1.50** |
注:与A组比较, *P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;与 B组比较,△P<0.05,△△P<0.01,△△△P<0.001 。
3讨论
疲劳是现代生活中的一种常见表现。疲劳是机体超负荷工作的信号,是用脑过度和睡眠不足的表现,同时也是一种病前状态和致病因素[3]。疲劳是人体脑力或体力活动到一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象。疲劳的产生与体内能量物质如肌糖原、肝糖原等的减少,代谢产物如LD蓄积等因素有关[4]。LD是糖酵解的终产物,其浓度增加使肌肉组织内的pH下降,而肌肉组织的pH降低是导致机体疲劳的一个主要因素。因此应当控制LD的增长以达到缓解疲劳的效果。LDH广泛存在于人体所有组织细胞的胞质当中,以肾含量最高,运动可使骨骼肌LDH活力降低,骨骼肌中的LDH在运动后大量进入血液,血清中LDH升高,而骨骼肌中的LDH活力下降,从而血液中的PH值升高,导致LD的累积[5]。葡萄糖以糖原的形式储存于肝脏,当机体需要时便分解为糖原,糖原是运动能量的主要来源,它的含量直接影响运动能力,增加糖原的储备或减少运动是糖原的消耗对提高速度增强耐受有重要意义[6]。大量研究表明运动导致的体力衰竭总是和肌糖原的耗竭同时发生,随着肌糖原消耗的不断增加,机体为维持血糖的平衡,将动用肝糖原而导致肝糖原减少。BUN是蛋白质的代谢产物,较长时间运动后,当机体长时间不能通过糖、脂肪分解代谢获得足够的能量,蛋白质与氨基酸分解代谢加强,血清尿素氮含量明显增加。机体血清尿素氮的含量随运动负荷的增加而增加,身体对负荷适应性越差,产生的尿素越多[7]。
药理实验证实人参皂苷能加速机体对糖原和三磷酸腺苷的合理利用,使在剧烈运动后产生的大量LD迅速转化为丙酮酸进入三羧酸循环,参加氧化供能的过程,为机体活动提供更多能量,因而人参能起到减轻机体的疲劳[8]。本次实验结果显示,鸡肉参能提高小鼠运动后糖原含量及LDH活力、降低LD与BUN含量。提示鸡肉参与人参有相似的功效,为机体供能,发挥抗疲劳的作用。
致谢:本课题得到大理学院药学院各教研室的大力支持,在此表示衷心的感谢!
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